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内毒素损伤新生小鼠肠道时盐酸乙醚对肠组织HIF_皇冠官网

皇冠官网 学前教育 2021年01月19日
本文摘要:摘要新生儿肠损伤是儿科罕见的疾病之一,其复发的主要原因是早产、窒息引起的恶耗氧、病毒感染等。其中相当严重的病毒感染往往会引起危重儿童胃肠功能中风。 肠在全身炎症反应综合症(SIRS)和多器官功能障碍综合症(MODS)的复发发展过程中起着非常重要的作用。肠道感染或坏死氧气可以在不损害肠黏膜屏障功能的情况下诱发细菌和内毒素的移动,引起败血症和脓毒性休克,进一步减轻肠组织损伤,预告远处器官受到牵连。LPS是典型的内毒素,可诱发内毒素血症,引起肠黏膜损伤。

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摘要新生儿肠损伤是儿科罕见的疾病之一,其复发的主要原因是早产、窒息引起的恶耗氧、病毒感染等。其中相当严重的病毒感染往往会引起危重儿童胃肠功能中风。

肠在全身炎症反应综合症(SIRS)和多器官功能障碍综合症(MODS)的复发发展过程中起着非常重要的作用。肠道感染或坏死氧气可以在不损害肠黏膜屏障功能的情况下诱发细菌和内毒素的移动,引起败血症和脓毒性休克,进一步减轻肠组织损伤,预告远处器官受到牵连。LPS是典型的内毒素,可诱发内毒素血症,引起肠黏膜损伤。国内外许多研究发现,氧诱导因子-1(HIF-1)和谷氨酰胺(Gln)在内毒素性肠损伤的病理转换过程中起着最重要的作用。

盐酸乙醚(PHC)是我国自主开发的抗胆药。研究表明,盐酸乙奎醚可以提高微循环,减少毛细血管壁通透性,增加溶酶体释放,进行多器官维护。目前,盐酸乙烯对内毒素性肺损伤的维护得到普遍确认和接受,我们通过大量临床观察发现,盐酸乙烯对停止肠痉挛、减少水肿有一定的疗效。

以上述背景为基础,本课题的目的是对内毒素损伤新生小鼠肠道时盐酸乙醚对肠组织HIF-1、Gln的提前注射影响和肠维持机制进行可行性研究。目的探讨盐酸乙奎醚被内毒素损伤新生大鼠肠时HIF-1、Gln传递的影响和肠维护相关机制,获得临床预防新生儿肠损伤的新思路。

材料和方法1。研究对象60只SPF级身体健康新生7日龄SD松鼠,由郑州大学河南省实验动物中心获得,雌性不收缩,体重182克。2.实验方法2.1实验动物小组本实验分为两个部分。

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第一部分:将30只小老鼠随机分为三组,每组10只。分别测定对照组(C两组)、肠损伤模型组(L两组)和盐酸乙奎德干预组(P两组),仔细观察肠的组织滑动/干重比测定、肠的组织形态变化观察、肠的组织内细胞因子传递等。

第二部分:30只小老鼠或多或少随机分为3组,C组4只、L组和P组各13只,仔细观察建模后小老鼠行为学的变化,计算出每组24h的存活率。2.2动物模型的肠损伤模型组腹腔静脉注射内毒素(细菌、脂肪多糖、LPS、E.Coli 055: B5、Sigma、美国)5毫克/公斤,提取浓度0.5毫克/毫升;盐酸乙醚干预组静脉注射内毒素30min,腹腔静脉注射盐酸乙醚(成都李斯特制药有限公司,批号:120603)2mg/kg,提取浓度为0.05MG/ML;是。对照组腹腔静脉注射生理盐水10毫升/公斤。

第一部分实验是在腹腔静脉注射内毒素或生理盐水后,进行6小时麻醉,解剖小老鼠。两部分造型完成后,将小老鼠拿出老鼠笼,与雌老鼠联合喂食。2.3张组织标本在密闭玻璃容器中排出铯,慢慢麻醉小老鼠后,用操作台、解剖、1ml注射器保存心脏采血,2小时,4下4000r/min离心15分钟,清液,-20冰箱。

会盟部3厘米采集结肠的组织7厘米,4 C生理盐水冲洗场3次,滤纸吸收肠的组织表面水分后,将7厘米结肠组织分为4段。顶部1厘米用光镜下形态学仔细观察,顶部2厘米是测量肠道的组织的湿重和干重,底部2厘米是制造肠道的组织的均匀,底部2厘米是RT-PCR检查场的组织HIF-1mRNA的传递。2.4检查指标2.4.1计算肠的组织滑移/干重量比(W/D)电子计量秤中2厘米结肠的组织,记录湿重量后,放入70C恒温沉箱中浸泡48h,到重量仍有变化,测定干重量,计算滑动/干重量比。2.4.2张组织形态学将上端1厘米结肠组织放入4%聚甲醛中,暂停检查。

石蜡包埋后制作4m病理切片进行HE染色。在400倍景象下仔细观察结肠组织粘膜上皮细胞形态学的变化。

2.4.3ELISA法在肠道组织中对TNF-、IL-6、HIF-1、Gln、二胺氧化酶(DAO TNF-、IL-6、HIF-1、Gln和DAO)的测试2.4.4RT-PCR法通过肠道组织HIF-1mRNA的传递,将以下2厘米结肠组织用DEPC水冲洗后吸出滤纸,即将液氮加热后放入冷却管,并放入-80冰箱暂停检查。肠组织总RNA提取、反转录、DNA扩张、琼脂糖凝胶电泳等阶段检测小鼠肠组织HIF-1 Alpha MRNA的传递。

3.统计处置使用SPSS17.0统计软件包展开统计分析,测量数据以平均标准差(S)响应,不同组之间使用单因素方差分析,两组大于明显差异法(LSD-t),=0.05作为检查水平。p。


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